Détermination de l’anticorps anti-M de type streptocoque du groupe A dans les sérums de patients atteints de fièvre rhumatismale après des années

Les anticorps protecteurs spécifiques du type M des streptocoques du groupe A – en particulier leur persistance chez l’homme – sont incomplètement compris Cette information est essentielle pour comprendre l’épidémiologie et la pathogenèse de ces infections et leurs séquelles et est également cruciale pour la production d’un vaccin streptococcique du groupe A. anticorps spécifiques de type années après qu’ils ont connu la fièvre rhumatismale documentée

Des études de Wannamaker et ses collègues au début s démontré l’importance des anticorps spécifiques de type M dans la résistance humaine à l’infection par le streptocoque du groupe A GAS Sur la base de ces rapports et quelques rapports subséquents, les efforts pour développer des vaccins GAS ont été largement basé sur des anticorps opsoniques protecteurs de type spécifique In, Lancefield décrit la persistance d’anticorps opsoniques de type spécifique dans des sérums humains pendant des années. Ce rapport est une base majeure pour la croyance que les anticorps opsoniques spécifiques aux protéines M persistent À notre connaissance, aucune information supplémentaire sur la durée de l’immunité spécifique à un type après une infection humaine naturelle n’a été publiée depuis. Ayant identifié des adultes de deux ans ayant eu un rhumatisme articulaire aigu à un âge avancé. lors d’une éclosion documentée à Dickenson, dans le Dakota du Nord , nous avons pu examiner leurs sérums afin d’étudier la persistance des ops spécifiques à la protéine M Les conclusions de la présente étude ajoutent aux rares informations sur la durée de l’immunité spécifique au type M après infection naturelle. Les conclusions ont des implications potentiellement importantes pour les stratégies vaccinales GAS basées sur la région opsonique hypervariable de la molécule de protéine M ont été obtenus chez des adultes de deux ans D- et D-, qui ont tous deux été atteints de fièvre rhumatismale documentée et ont été inclus dans le rapport publié du foyer ML et RF Les échantillons sériques des sujets D- et D- ont été obtenus après réception L’activité opsonique de ces sérums a été déterminée à l’aide du test bactéricide, un test in vitro qui détermine la destruction phagocytaire dépendante des anticorps spécifique au type du SGA croissant dans le sang humain. La méthode bactéricide classique de Lancefield et une modification publiée de cette technique incorporant une étape de préopsonisation ont été utilisésBriefly, le preop méthode de sonication utilisée en phase stationnaire GAS qui ont été préincubés avec le sérum à tester Après cette étape de préopsonisation, une aliquote du mélange GAS-sérum a été ajoutée au sang total humain fraîchement obtenu et hépariné. Ce mélange a ensuite été incubé, avec mélange constant à la fin Pour vérifier la mort ou l’inhibition de la croissance du SGA au cours du test, des numérations de colonies viables sur des plaques de gélose au sang ont été effectuées pour toutes les combinaisons SGA-Sérum avant de commencer et après Les sérums testControl utilisés dans tous les tests bactéricides comprenaient des sérums hyperimmuns anti-M et anti-M-lapin, du sérum normal de lapin et des sérums humains normaux. La croissance du test a été calculée en divisant le nombre de colonies post-test via le pré-test correspondant. numération des colonies, comme décrit par ailleurs L’indice de croissance GI résultant a ensuite été utilisé pour calculer le pourcentage d’inhibition pour chaque sérum testé, comme suit: [GInegative contro l-GItest] / Contrôle négatif Comme suggéré dans le rapport de Hu et al ,% d’inhibition a été considérée comme significative Toutes les expériences ont été répétées et les résultats étaient comparables Toutes les souches de GAS et les sérums témoins provenaient de la vaste collection de notre laboratoire. L’UMN, isolée lors de l’épidémie de fièvre rhumatoïde de Dickenson, a été reçue de Zimmerman, l’un des auteurs du rapport. La souche UMN de référence a été obtenue auprès de Maxted du Public Health Service Laboratory de Londres. Les souches de GAS étaient à l’origine caractérisées par un sérotypage M classique et ont été récemment confirmées par le typage de la séquence du gène emm. La souche de référence M a été identifiée comme sous-type emm La souche associée à la flambée de Dickinson M- s’est avérée être une séquence emm précédemment non reconnue désignée par la suite emm La séquence diffère de emm par une substitution de base unique qui résultera La détection de l’activité opsonique non spécifique de type dans les sérums de test a permis d’inclure la souche M-GAS comme témoin dans tous les tests M- a longtemps été rare Aux États-Unis, la probabilité d’exposition préalable des sujets et des témoins a été significativement réduite. Aucune inhibition de la croissance M n’a été constatée, que ce soit par le sérum du sujet ou par le sérum anti-M-lapin. le sérum anti-M-lapin a entraîné la destruction complète de la souche homologue. Ainsi, aucune activité bactéricide non spécifique n’a été détectée.

Anticorps acéricide Sérum de la souche inhibée de D-MAS de la souche M-GAS de référence par rapport au sérum humain de contrôle ou de sérum de lapin En revanche, le sérum du sujet D- ne montre aucune inhibition de la croissance de la souche de référence M- de la souche M- associée à l’épidémie de fièvre rhumatismale en% Cette activité bactéricide contre la souche M de la fièvre rhumatismale emm ne différait pas de façon significative de celle observée avec la souche M- de référence génétiquement distincte emm, suggérant que les différences structurales de la protéine M entre ces souches n’influençaient pas la sensibilité aux anticorps sériques opsoniques. Les études de discussion du début ont d’abord démontré le rôle important des anticorps spécifiques de type M dans la résistance à l’infection causée par le sérotype M homologue. chez l’homme Cependant, la durée de persistance de ces anticorps « protecteurs » après infection naturelle chez l’homme n’a pas L’opportunité d’évaluer la persistance d’anticorps protecteurs opsoniques spécifiques dans des sérums humains prélevés des années après une infection à GAS de bonne foi entraînant une fièvre rhumatismale est unique, autant que nous puissions le déterminer. En fait, nous ne connaissons aucune autre tentative de confirmation. le rapport de Lancefield dans lequel elle a démontré sa persistance dans les sérums humains après une infection au Gang pharyngée naturelleNous avons choisi d’utiliser une méthode bactéricide de préopsonisation plus sensible après que la technique classique de Lancefield de tests bactéricides indirects n’a produit aucune inhibition significative du GAS croissance par le sérum de l’un des sujets Nous avons pu confirmer la présence d’anticorps bactéricides sériques contre la souche M- épidémique près d’un demi-siècle après une infection naturelle au pharynx. La nécessité d’utiliser un test plus sensible suggère que seuls des niveaux d’anticorps Étant donné que les niveaux protecteurs de la bactérie opsonisante circulante Les anticorps ricidaux chez l’homme n’ont pas été définis avec précision, on ne peut que spéculer sur leur signification protectrice in vivo chez l’homme. Nous avons également confirmé la spécificité du sérotype M des anticorps opsoniques circulants. D- Croissance de la souche M- associée à la fièvre rhumatismale. – la souche de référence était significativement inhibée par le sérum D, alors que ce sérum n’entraînait aucune inhibition détectable de la croissance de la souche M-référence. Ces résultats indiquent que les anticorps opsonisants non spécifiques ou d’autres substances ne sont probablement pas responsables de l’activité bactéricide observée. – SouchesPourquoi seuls les sujets ayant confirmé un rhumatisme articulaire aigu présentaient une activité opsonique persistante contre la souche M spécifique associée à l’éclosion, reste sans réponse. Cependant, notre différence observée est cohérente avec notre analyse supplémentaire du rapport de Lancefield , qui n’a révélé aucune corrélation entre « niveaux inférieurs » de l’activité bactéricide a La disparité observée pourrait être liée aux différences inhérentes à la capacité de réponse immunitaire d’un individu. De plus, on ne peut éliminer avec certitude la possibilité que le sujet ayant « plus » d’anticorps D- ait été exposé à ceci ou à une autre. La souche M-streptococcique pendant les années intermédiaires, ce qui a « boosté » les niveaux d’anticorps. Des essais ont été menés pour évaluer l’efficacité d’un vaccin multivalent contre le SGA; les résultats préliminaires ont été encourageants Une préoccupation de longue date concernant les vaccins à base de protéines M a été de savoir si une protection adéquate serait fournie contre des souches variantes dans un sérotype M de SGA qui montrent de petits changements dans la protéine M. Nos données suggèrent, Bien que le sérum du sujet D- ait montré une inhibition de croissance légèrement plus importante de la souche d’invasion emm comparée à la souche de référence emm vs%, nous pensons que la différence était probablement dans les limites d’erreur de la technique. tué les deux souches M- Considérées ensemble, ces résultats suggèrent qu’un individu avec une immunité naturelle ou induite par le vaccin soit actuellement considéré comme le sous-type d’emm’s le plus commun aux Etats-Unis ou pourrait posséder une protection croisée contre l’autre sous-type. accord avec un rapport récent de Dale et al La durée de la protection induite par le vaccin par rapport à la Les observations confirment et étendent les premiers résultats de Lancefield Si l’anticorps opsonisant circulant est un prédicteur fiable de la protection, alors la protection peut potentiellement durer des décennies après l’infection naturelle. La protection vaccinale peut être aussi de longue durée, mais jusqu’à ce que plus d’informations soient disponibles à partir d’essais humains prospectifs, la durée de la protection contre l’infection par le SGA, naturelle ou induite par un vaccin, nécessite une étude plus approfondie.

Remerciements

Nous sommes particulièrement reconnaissants envers les sujets ML et RF qui ont accepté de participer à cette étude unique. Soutien financier Rheumatic Fever Research Fund de la Minnesota Medical Foundation Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: no conflicts

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