Résurgence de la fièvre des champs dans un pays tempéré: une épidémie de leptospirose chez les récolteurs saisonniers de fraises en Allemagne

Contexte Bien que la leptospirose soit une zoonose réémergente d’importance mondiale, les éclosions liées aux expositions agricoles se situent principalement dans les pays tropicaux. En juillet, une éclosion de leptospirose a été constatée chez des fraises d’Europe de l’Est qui travaillaient en Allemagne. Nous avons mené une étude de cohorte rétrospective en utilisant un questionnaire administré aux récolteurs par les autorités sanitaires en Roumanie, en Slovaquie et en Pologne. Les échantillons de sérum recueillis ont été testés par test d’agglutination microscopique et immunoglobuline M dosage immuno-enzymatique. défini comme une personne qui a travaillé dans la fraise pendant la période de juin à septembre et qui présentait des symptômes compatibles avec la leptospirose et un titre d’anticorps ⩾: et un résultat positif de dosage immuno-enzymatique pour un cas confirmé ou pas de confirmation sérologique f ou un cas suspecté Les rongeurs locaux ont été examinés pour la leptospiroseRésultatsAmong fraises, nous avons détecté des cas confirmés qui ont des résultats positifs pour les anticorps contre le sérogroupe Grippotyphosa et le taux d’attaque des patients suspects,% Risque de maladie augmenté avec chaque jour où un individu a travaillé la pluie avec des blessures à la main odds ratio; % intervalle de confiance, – et odd ratio de contact accidentel des rongeurs,; % Intervalle de confiance, – Les leptospires du sérogroupe Grippotyphosa ont été isolés des reins de% des volesConclusionsCeci est, à notre connaissance, la plus grande épidémie de leptospirose en Allemagne depuis le contact entre les lésions des mains et de l’eau ou du sol contaminés. source de la flambée la plus probable L ‘hiver inhabituellement chaud de la population de campagnol soutenu et a contribué à cette résurgence de la leptospirose en Allemagne En raison du changement climatique en cours, une sensibilisation accrue à la leptospirose dans les régions tempérées est justifiée

La leptospirose est une maladie zoonotique causée par des spirochètes appartenant au genre Leptospira. L’infection humaine se produit par contact direct avec l’urine des réservoirs animaux ou par contact avec de l’eau ou du sol contaminé. Les symptômes cliniques comprennent: fièvre, frissons et céphalées; La maladie de Weil, caractérisée par une jaunisse, une insuffisance rénale et une hémorragie La fièvre de Field est une présentation de la leptospirose qui est typiquement liée à des infections dues à des espèces de Leptospira serovar Grippotyphosa Historiquement, des foyers de leptospirose en Europe ont été observés. associée aux risques d’exposition agricole, qui étaient principalement limités aux environnements ruraux Cependant, avec la mécanisation de l’agriculture, l’amélioration de l’assainissement et la réduction des réservoirs animaux, la leptospirose épidémique a disparu au début des années. exister en Allemagne, expositions liées à l’acte récréatif Récemment, la leptospirose a été identifiée comme une maladie zoonotique réémergente affectée par le changement climatique global En juillet, une épidémie d’étiologie inconnue a été signalée à l’unité de santé locale de Düren, en Allemagne. toutes les personnes impliquées dans l’épidémie étaient des récolteuses saisonnières de fraises de Roumanie, Slovaquie et Pologne qui présentaient des symptômes gastro-intestinaux et travaillaient dans une ferme voisine Treize personnes ont été hospitalisées et un large spectre de pathogènes a été étudié sans résultat positif. de la ferme ont été testés, et tous ont eu des résultats négatifs Bien que l’épidémie ait diminué, les échantillons de sérum obtenus des patients ont finalement été testés pour la leptospirose; les échantillons ont eu des résultats positifs, et la leptospirose a été soupçonnée comme cause possible d’éclosion. Une enquête sur l’éclosion a été entreprise pour déterminer la source de l’éclosion et les facteurs de risque possibles d’infection par la leptospirose.

Patients et méthodes

sur une base volontaire Un patient confirmé était défini comme un individu présent à la fraise pendant la période de juin à septembre et qui avait de la fièvre et au moins un autre symptôme et / ou avait reçu un diagnostic évocateur de leptospirose incluant une insuffisance rénale, méningite céphalées, symptômes pseudogrippaux et vomissements, ainsi que résultats sérologiques positifs ⩾: pour les anticorps dirigés contre le sérogroupe Grippotyphosa et un résultat positif au test ELISA pour les anticorps IgM Un patient suspect était un individu épidémiologiquement et cliniquement associé à l’éclosion chez qui Les sérums prélevés ont été conservés entre-° C et – ° C jusqu’à leur livraison au Laboratoire de la leptospirose de l’Institut fédéral d’évaluation des risques à Berlin, en Allemagne. Le test de microagglutination a été utilisé pour détecter les anti-leptospires. anticorps dans les échantillons sériques Dix-sept souches de référence sérogroupes et sérotypes sérovars Australis, Autumnalis, Batavia, Bratislava, Canicola, Copenhague, Grippotyphosa, Hardjo, Pomona, Saxkoebing, Sejroe, Tarassovi, Ballum, Icterohaemorrhagiae, Pyrogène, Hebdomadis, et Javanica ont été utilisés pour le test de microagglutination Titres d’anticorps ⩾: ont été considérés Un antigène leptospiral était considéré comme représentant l’agent infectieux lorsque les réactions croisées étaient absentes ou lorsque les titres du test de microagglutination vis-à-vis de cet antigène ⩾: étaient au moins des dilutions en série. Plus élevé que les titres contre d’autres antigènes leptospiraux Tous les échantillons identifiés comme positifs par test de microagglutination ont été testés pour les anticorps IgM avec un kit ELISA commercial Virion / SerionAnalyses statistiques Les taux d’attaque stratifiés par âge, sexe et nationalité ont été calculés. prendre l’exponentielle de la moyenne de la log tite Transformations r L’association entre les expositions et le résultat de la leptospirose a été examinée par analyse univariée. Les rapports de risque ou OR et leurs% IC et P ont été calculés Variables avec un P & lt; sur l’analyse univariée ont été inclus dans les modèles de régression logistique multivariée, et l’élimination par paliers a été utilisée pour identifier le modèle final avec des facteurs significativement associés à l’infection par la leptospirose Le modèle final a été vérifié pour l’interaction et la colinéarité P & lt; Les analyses ont été effectuées avec le logiciel Stata, la version StataCorp et le logiciel SPSS, version SPSSEnvironmental investigation En septembre, nous avons étudié le champ de fraises qui a été travaillé durant l’épidémie sur une période d’une journée pour identifier le réservoir animal d’infection. Des rongeurs capturés vivants ont été pondus chaque long des champs et à travers le champ. Les rongeurs capturés ont été retirés et conservés dans des conteneurs jusqu’à ce que le transport à la faculté vétérinaire de l’Université libre de Berlin soit anesthésié On a ensuite euthanasié les reins, la vessie et le foie pour la culture et l’examen histologique. La technique de l’avidine-biotine-peroxydase a été utilisée pour détecter par immunohistochimie les leptospires dans des échantillons tissulaires de reins et de foies de souris inclus par la lumière. microscopie En bref, diapositives ont été incubés avec un antisérum de lapin polyvalent contre l’Institut Fédéral Leptospira Grippotyphosa pour l’évaluation des risques à une dilution de: pour h à ° C, avec IgG anti-lapin de chèvre Sigma-Aldrich à une dilution de: pour min à ° C, et avec le complexe streptavidine-biotine-peroxydase de lapin Sigma-Aldrich à une dilution de: pour min à ° C -Amino- éthylcarbazol Sigma-Aldrich a été utilisé comme système substrat-chromogène. Les lames ont été contre-colorées avec de l’hématoxyline-éosine. Par la suite, des échantillons ont été cultivés dans des milieux Ellinghausen, McCollough, Johnsen et Harris contenant% de gélose BBL,% de sérum de lapin et des substances inhibitrices, la rifampicine, pg / ml; A cette fin, on a inoculé des μL de suspension diluée – et – en tant que triplicats dans des tubes de culture qui ont été cultivés à ° C et vérifiés une fois par semaine pendant des mois. Des isolats ont été spécifiés pour le sérogroupe et le sérovar de Leptospira en utilisant des anticorps monoclonaux au Royal Tropical Institute Organisation mondiale de la Santé / Organisation pour l’alimentation et l’agriculture du Centre collaborateur des Nations Unies pour référence et recherche sur la leptospirose à Amsterdam, Pays-Bas Les enregistrements de précipitations et de température ont été obtenus auprès du bureau météorologique allemand

Résultats

Description de l’éclosion Des personnes incluses dans la liste, ont été contactées et% ont accepté de participer à l’étude Parmi les personnes ayant accepté de participer,% étaient polonaises,% étaient roumaines et les% restantes étaient slovaques Cinquante-quatre pour cent de l’étude Au total, les cas confirmés et suspects se sont produits de juin à août chez les récolteurs travaillant dans les plus grands champs de fraisiers d’une ferme productrice de fraises près de Düren, Rhénanie-du-Nord-Westphalie, Allemagne Le nombre de cas a atteint un sommet au cours de la première semaine de juillet. Cinquante pour cent des cas concernaient des femmes, l’âge médian des participants avec des cas suspects ou confirmés était de quelques années et% des participants suspectés ou confirmés Les cas étaient d’origine rom Le taux d’attaque global était de% et ne différait pas entre les hommes et les femmes participants à l’étude Bien que les individus de tous âges m ans à travers les années ont été touchés, le taux d’attaque était le plus élevé chez les personnes âgées ans – taux d’attaque,%

Figure Vue largeDownload slideDistribution des cas de leptospirose sérologiquement confirmés et soupçonnés, par semaine de survenue, dans une épidémie survenue près de Düren, en Allemagne, en Figure Vue largeDownload slideDistribution des cas sérologiquement confirmés et suspectés de leptospirose, par semaine d’apparition, dans une épidémie La distribution des symptômes autodéclarés et des diagnostics est indiquée dans le tableau La maladie clinique était légère dans la plupart des cas, les maux de tête étant le symptôme le plus fréquemment rapporté% des cas, suivis des symptômes gastro-intestinaux et respiratoires Une petite proportion des patients ont développé des complications de la méningite% des cas et un ictère%, et% des cas ont nécessité une hospitalisation Parmi les patients hospitalisés, la leptospirose a été diagnostiquée à tort comme une méningite virale ou des infections gastro-intestinales Aucun décès n’a été signalé

Tableau View largeDownload slideDistribution des symptômes et des diagnostics chez les patients présentant des cas confirmés ou suspectés de leptospiroseTable View largeTélécharger slideDistribution des symptômes et des diagnostics chez les patients présentant des cas confirmés ou suspects de leptospiroseRésultats de laboratoire Des prélèvements sanguins ont été réalisés chez des participants roumains et slovaques. échantillons de sérum testés,% étaient positifs pour les anticorps contre sérogroupe Grippotyphosa titre de test de microagglutination, ⩾ :, et% avaient des titres ⩾: Le titre moyen d’anticorps pour sérogroupe Grippotyphosa était: gamme,: à: Quatre personnes% avec anticorps contre sérogroup Grippotyphosa titres de: ,:,:, et: avaient également des titres d’anticorps pour les titres sérogroupes Pomona de: chez les deuxième et quatrième individus et: chez le premier ou le sérogroupe titrage de Bratislava: chez le troisième individu en% des personnes séropositives pour le sérogroupe Grippotyphosa, les symptômes qui étaient compatibles avec la leptospirose étaient les titres de test de microagglutination rapportés,: chez les personnes,: chez les personnes, et: en personne Une personne supplémentaire a eu des résultats de tests positifs pour d’autres sérogroupes sérogroupe Copenhageni:; sérogroupe Pomona,: Tous les échantillons testés positifs avec titres ⩾: ont également obtenu des résultats ELISA positifs pour les anticorps IgM anti-leptospiraux Résultats analytiques de l’étude de cohorte Treize cas confirmés tous survenus chez des individus roumains et des cas suspects inclus dans l’analyse Manger des fraises non lavées risque relatif; % CI, -; P =, récolte avec des lésions de la main non couvertes, risque relatif; % CI, -; P =, et le contact accidentel des rongeurs sur le risque relatif du champ; % CI, -; P = étaient des facteurs de risque d’infection à la leptospirose dans le tableau d’analyse univariée Dans l’analyse de régression univariée, il n’y avait pas d’association statistiquement significative entre le nombre de jours de récolte OU,; % CI, -; P = ou le nombre de jours de récolte sous la pluie en tant que variables continues OU,; % CI, -; P = et le risque de leptospirose Cependant, une association statistiquement significative a été trouvée entre le risque de développer une infection et le nombre de jours de prélèvement avec des plaies à la main. % CI, -; P = et le nombre de jours de récolte sous la pluie avec plaies à la main OU; % CI, -; P & lt; Dans le modèle multivariable final, seule la récolte sous la pluie avec des lésions de la main restait un facteur de risque statistiquement significatif pour l’infection, de sorte que chaque jour ouvrable sous la pluie avec des plaies à la main, les chances d’infection étaient% CI, -; P & lt; Les risques d’infection avec chaque jour travaillé sous la pluie sans lésions de la main n’étaient pas statistiquement significatifs. % CI, -; P = Le contact accidentel avec les rongeurs était également associé indépendamment à l’infection OU; % CI, -; P = en analyse multivariée L’exclusion des cas suspects n’a pas affecté le résultat de l’analyse multivariée chaque jour ouvrable sous la pluie avec des plaies à la main: OR; % CI, -; P & lt ;; contact accidentel avec les rongeurs: OU; % CI, -; P =

Analyse de l’analyse multivariée de la relation entre les facteurs de risque et l’infection à la leptospiroseTable View largeTélécharger slideAnalyse multivariée et multivariée de la relation entre les facteurs de risque et la leptospiroseEnvironmental investigation Onze campagnols communs Microtus arvalis ont été capturés dans les fraisiers et les environs. Les reins de% des souris ont été identifiés par séquençage d’ADN et par des anticorps monoclonaux tels que Leptospira kirschneri sérovar Grippotyphosa et sérovar Vanderhoedeni. Par examen histopathologique, une infestation massive de leptospires a été confirmée dans les reins de souris avec des résultats de culture positifs. ont été testés pour une infection par leptospirose; Parmi ceux-ci,% avaient des résultats positifs pour le même sérogroupe, avec des titres de test de microagglutination allant de: à: La zone où l’épidémie a eu lieu a enregistré des températures mensuelles moyennes de – ° C de mai à août rhinopharyngite de l’enfant. Le printemps le plus pluvieux à ce jour et les températures hivernales ont été les plus chauds à ce jour. La température moyenne quotidienne a varié entre ° C et ° C. d’une plage de mm, – mm de pluie tombée par jour, ce qui correspond à L d’eau de pluie par mètre carré. Une deuxième période de précipitations a été enregistrée jusqu’en juin, période pendant laquelle la moyenne des précipitations était de mm par jour ° C L’inspection du site de l’épidémie en septembre a révélé une densité anormalement élevée de trous de souris dans le champ et dans les zones environnantes. trous / m Après de fortes précipitations, de grandes flaques se sont accumulées entre les rangs de fraisiers observés sur un champ adjacent au champ de la flambée. Pendant la période de flambée, les mêmes conditions étaient présentes sur le champ de la flore qui avait été labouré au moment de la visite.

Figure View largeTélécharger slideFloc de fraises situé près du champ de l’épidémie, après de fortes précipitations en septembre Les mêmes conditions étaient présentes pendant la période de flambéeFigure Vue largeTélécharger DiaporamaFloc de fraises près du champ de la flambée, après de fortes précipitations en septembre période

Discussion

Les plaies sont plus fréquentes lorsque les individus travaillent plus longtemps sur le terrain, ce qui peut également augmenter la probabilité de consommation de fraises. La détection du sérogroupe Grippotyphosa chez les patients et chez les campagnols capturés est fortement en accord avec le modèle de multivarié. rôle du campagnol comme réservoir d’entretien et source d’infection dans cette épidémie Des preuves anecdotiques suggèrent que les populations de rongeurs ont augmenté considérablement en , ce qui est confirmé par la forte densité de trous de campagnols observés sur le terrain. Le potentiel épidémique des infections comme la leptospirose , ont un nombre de reproduction proche de, sont minimalement transmissibles au sein des populations humaines, est largement déterminé par le nombre d’introductions d’animaux hôtes Ainsi, parmi d’autres facteurs contributifs, par exemple, la prévalence de la leptospirose dans la population de campagnols et le taux d’excrétion, une augmentation des populations de rongeurs pourrait conduire à une augmentation future de l’infection En outre, les pays d’Europe ont enregistré l’automne le plus chaud depuis le début des enregistrements , et l’hiver a été exceptionnellement chaud. Dans la zone de la flambée, la température moyenne a été En mai, les mois de mai et de juin ont été les mois les plus pluvieux depuis que l’enregistrement des précipitations a commencé en Allemagne. Les hivers plus doux avec une diminution des chutes de neige supportent les populations de campagnols En outre, les populations de campagnols subissent des fluctuations tous les ans, avec des densités pouvant aller jusqu’à un nombre de campagnols / hectare. Ces conditions environnementales étaient également idéales pour les leptospires, ce qui réduit les disponibilités alimentaires. peut survivre dans le sol inondé par l’eau de pluie pendant au moins des semaines et trouver des conditions favorables à la température s ⩾ ° C Lorsque les conditions idéales de croissance des campagnols et des Leptospires coïncident, un contact rongeur-humain renforcé, qui offre de meilleures opportunités de transmission de la maladie, peut se produire.Leptospirose endémique et épidémique Au cours de la dernière grande flambée de fièvre en Allemagne, des cas ont été signalés chez des pêcheurs de pois après une période inhabituelle de fortes pluies, et le hamster européen Cricetus cricetus a été identifié comme l’animal réservoir . contribuent à la dynamique changeante de la maladie, les facteurs climatiques décrits ont vraisemblablement contribué à la réémergence de la fièvre des champs en Allemagne, malgré la poursuite des mesures qui ont permis de réduire l’incidence des maladies au cours des dernières décennies. résultant en moins de périodes de temps très froid et plus de périodes de très chaud temps Bien qu’il soit difficile de prédire les changements futurs des précipitations, les périodes de fortes pluies soudaines vont probablement devenir plus fréquentes en Europe Les inondations sont un aspect du changement climatique qui a un impact important sur la santé et sur les maladies transmises par les rongeurs. Bien que les précédentes inondations aient eu lieu dans les climats tropicaux, un plus grand nombre d’épidémies de leptospirose se produira probablement dans les régions tempérées car l’Europe connaît des hivers plus chauds et des étés plus tropicales. limites de nos résultats Bien qu’une définition de cas très spécifique ait été utilisée pour identifier les infections récentes chez les patients ayant fourni un échantillon de sérum, nous reconnaissons la possibilité d’une erreur de classification chez les personnes répondant à la définition des cas suspects. D’autre part, une définition de cas plus sensible reflète plus précisément le nombre réel de En outre, l’exclusion des cas suspects n’a pas influé sur le résultat de l’analyse multivariée. Enfin, un biais de rappel peut exister pour les antécédents d’exposition chez les personnes qui ont subi une éclosion de la leptospirose. En conclusion, nous proposons que la leptospirose puisse servir de modèle pour une maladie endémique affectée par le changement climatique L’impact du réchauffement climatique sur la santé étant encore imprévisible, une surveillance accrue des populations humaines et animales est essentielle pour des interventions opportunes. avec un risque accru de contact avec les rongeurs, le contrôle des rongeurs peut être bénéfique et les lésions doivent être recouvertes de pansements imperméables. Les gants doivent être portés, en particulier par les professionnels exposés aux fortes pluies. , les patients peuvent être invités à recevoir de la doxycycline en prophylaxie post exposition traitement

Remerciements

Nous remercions l’autorité sanitaire locale de Düren, en Allemagne, d’avoir fourni des informations et un soutien utiles; Matthias an der Heiden, pour son soutien statistique et ses conseils; les instituts nationaux de santé publique en Roumanie, en Pologne et en Slovaquie, pour leur réaction enthousiaste et leur collaboration efficace au cours de l’enquête épidémiologique; Andreas Jansen, pour la photographie utilisée dans la figure; et Wendy van Zaanen, Marga Goris et Rudy Hartskeerl, de l’Organisation mondiale de la santé / Organisation des Nations Unies pour l’alimentation et l’agriculture / Organisation mondiale de la santé animale et Centre de collaboration nationale pour la référence et la recherche sur la leptospirose, Amsterdam, Pays-Bas , pour taper les isolats de Leptospira Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: pas de conflits

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