Diagnostic rapide de la méningite tuberculeuse par des dosages à base de cellules T sur des cellules mononucléaires de sang périphérique et de liquide céphalorachidien

Contexte Le rôle du nouveau test ELISPOT immuno-enzymatique spécifique à Myocbacterium tuberculosis pour le diagnostic de la méningite tuberculeuse n’a pas encore été pleinement évalué. Nous avons mené une étude observationnelle prospective, en aveugle, pour évaluer la précision diagnostique de ce test. avec les tests conventionnels, pour diagnostiquer TBMMethods Tous les patients adultes suspectés de TBM ont été recrutés dans un centre de soins tertiaires à Séoul, en Corée du Sud pendant une période d’essai de ELISPOT sur des cellules mononucléaires périphériques et des cellules mononucléaires du liquide céphalo-rachidien. suspicion de TBM Parmi ceux-ci,% ont été classés comme TBM confirmés, hautement probables et probables, et% ont été classés comme n’ayant pas de tuberculose active. Les% restants avec TBM possible ont été exclus de l’analyse finale Les sensibilités et spécificités, respectivement, des méthodes testées pour le diagnostic de TBM étaient les suivantes: C Niveau d’adénosine désaminase SF & gt; U / L,%% intervalle de confiance [CI],% -% et%% CI,% -%; cellules mononucléaires périphériques ELISPOT,%% CI,% -% et%% CI,% -%; et dosage ELISPOT des cellules mononucléaires du LCR,%% IC,% -% et%% CI,% -% La sensibilité combinée d’un niveau d’adénosine désaminase & gt; Un résultat d’analyse ELISPOT des cellules mononucléaires périphériques positives était%% CI,% -%, conférant un rapport de vraisemblance négatif de% CI, – lorsque les deux résultats étaient négatifs. Les tests ELISPOT de consolidation utilisant des cellules mononucléaires périphériques et des cellules mononucléaires du LCR sont des compléments utiles. aux tests actuels de diagnostic de la TBM, en particulier lorsqu’ils sont utilisés en association avec l’évaluation du taux d’adénosine désaminase dans le LCR

Bien que la TBM soit un grave problème de santé global, les cliniciens ne sont pas toujours capables de lancer correctement le traitement sur la base des signes et des symptômes, des résultats des analyses de routine du LCR du liquide céphalo-rachidien et des résultats radiologiques. sont souvent attribuables à l’utilisation de tests diagnostiques conventionnels lents ou relativement peu sensibles, ont été associés à des taux de mortalité élevés chez les patients avec TBM Par conséquent, nous avons besoin d’un test rapide, sensible et spécifique pour le diagnostic de TBM. , une nouvelle génération de tests TB tuberculosis diagnostiques, qui utilisent des antigènes spécifiques de Mycobacterium tuberculosis codés par des gènes situés dans la région de différence RD, ont montré des résultats prometteurs dans le diagnostic d’infection tuberculeuse latente et de tuberculose pulmonaire active ou extrapulmonaire connu, cependant, sur l’utilité de ces tests pour le diagnostic TBM dans la pratique clinique quotidienne En outre, il y a une question concernant quels échantillons cliniques devraient être utilisés pour ces tests, parce que les cellules mononucléaires qui sont compartimentées sur les sites d’infection, par exemple les cellules du liquide pleural , le liquide de lavage bronchoalvéolaire , et le LCR Pour répondre à ces questions, nous avons réalisé une étude observationnelle prospective, en aveugle, pour évaluer la précision diagnostique des tests ELISPOT immuno-enzymatiques à base de cellules mononucléées circulantes et compartimentées pour le diagnostic de la leucémie par voie interféron-γ. tuberculose active chez les patients présumés tuberculeux

Méthodes

Population étudiée Des patients adultes suspects TBM admis au Asan Medical Center, un hôpital tertiaire à Séoul, en Corée du Sud, ont été recrutés prospectivement d’avril à mars. Si les médecins traitants JKK et SAL considéraient que le TBM faisait partie du diagnostic différentiel et l’individu était âgé de plusieurs années, nous l’avons invité à participer à cette étude et à fournir un consentement éclairé. Un test cutané à la tuberculine a été réalisé, comme décrit ailleurs Des échantillons microbiologiques et pathologiques pour le diagnostic du TBM ont été traités , comme décrit ailleurs Les décisions concernant le traitement antituberculeux ont été prises par les médecins traitants, JKK et SAL, en fonction des caractéristiques cliniques initiales de chaque patient, des résultats des analyses sanguines, des résultats des images et des profils du liquide céphalo-rachidien. caché aux médecins traitants, pour éviter un biais car les résultats du test ELISPOT peuvent avoir affecté le ph Les décisions des médecins sur la thérapie antituberculeuse empirique Le protocole de l’étude a été approuvé par l’Institutional Review Board de notre hôpital. Catégorie clinique de TBM Tous les cas ont été indépendamment classés par les investigateurs de l’étude O-HC et S-HK Résultats d’ELISPOT La classification a été basée sur des informations cliniques, histopathologiques, radiologiques et microbiologiques recueillies au cours des mois de suivi. La catégorisation clinique des patients suspects TBM a été réalisée comme décrit ailleurs [,,,] Bref, les patients ont été classés comme «Tuberculose confirmée» si les échantillons cliniques étaient positifs pour M tuberculosis en culture ou par M tuberculosis polymérase en chaîne Réaction PCR Les patients ont été classés comme ayant un «TBM hautement probable» s’il y avait des cas de pléocytose lymphocytaire, d’augmentation des taux protéiques et cultures stériles, plus ⩾ des critères de soutien suivants Les patients ont été classés comme ayant BM «s’il y a eu des cas de pléocytose lymphocytaire, de taux de protéines élevés et de cultures stériles, plus les critères suivants: critères de tomodensitométrie / résonance magnétique révélant une hydrocéphalie, des granulomes ou des exsudats basaux; preuve de TB extraneurale; et réponses appropriées à la chimiothérapie antituberculeuse Les patients ont été classés comme ayant un «possible TBM» s’ils ne remplissaient pas les critères ci-dessus, mais un diagnostic de TB active ne pouvait être exclu. Les patients étaient classés «non TB» lorsqu’un autre diagnostic avait été posé. en l’absence d’un traitement antituberculeux dans les mois qui suivent l’admission à l’hôpital, car on s’attendrait à ce que le TBM non traité cause la mort pendant cette période tests ELISPOT Les tests ELISPOT T-SPOTTB; Oxford Immunotec ont été réalisées comme décrit ailleurs Brièvement, le sang veineux périphérique ~ mL a été prélevé chez les participants, et les PBMC ont été immédiatement séparés et recueillis simultanément avec un prélèvement veineux, ~ mL échantillons du volume médian de LCR du LCR, mL; intervalle interquartile, – mL ont été obtenus à partir de patients qui ont accepté d’échantillonnage CSF supplémentaire, et les cellules mononucléaires du liquide céphalorachidien CSF-MCs ont été immédiatement séparés et recueillis min Les cellules recueillies ont été suspendues dans AIM-V médias GIBCO à des concentrations de × cellules / mL pour PBMC et x cellules / mL pour les CSF-MCs Les PBMC préparés et les CSF-MC ont été distribués x cellules / puits sur des plaques qui avaient été pré-revêtues d’anticorps anti-interféron-g humain, et les échantillons ont été cultivés. en utilisant un microscope automatisé ELiSpot HR; Autoimmune Diagnostika GmbH Nous avons utilisé le critère pour les résultats indéterminés comme décrit ailleurs En bref, une réponse a été classée comme indéterminée si le nombre de points pour le contrôle positif était & lt; Analyses statistiques Les analyses statistiques ont été effectuées en utilisant SPSS pour Windows, version SPSS, et le progiciel MedCalc, version Les variables continues de MedCalc Software ont été comparées en utilisant le test U de Mann-Whitney ou le test de Student. t test Tous les tests de signification ont été terminés et P⩽ a été considéré comme significatif. La performance diagnostique a été exprimée en termes de sensibilité, spécificité, valeur prédictive positive, valeur prédictive négative, rapport de vraisemblance positif et rapport de vraisemblance négatif. utilisé ici pour le diagnostic de TBM, nous avons évalué le point de coupure optimal en construisant une courbe ROC de caractéristique de fonctionnement du récepteur qui a tracé le taux de sensibilité contre le taux de faux positifs sur une gamme de valeurs seuil valeur de coupure optimale en tant que point de la courbe ROC le plus éloigné de la ligne diagonale qui maximise la somme de la sensibilité et de la spécification city ​​Pour évaluer le test préféré pour la prédiction de TBM, nous avons comparé les zones sous les courbes ROC

Résultats

Caractéristiques des patients Quatre-vingt-neuf sujets suspects de TBM ont été inclus dans l’étude. Parmi ceux-ci,% ont été classés comme ayant un TBM confirmé,% comme TBM hautement probable,% comme TBM probable et% comme non TB. en accord complet sur ces classifications Les investigateurs ne sont pas d’accord sur la classification des patients%, qui ont donc été classés comme potentiellement TBM et ont été exclus de l’analyse finale. Figure Les caractéristiques cliniques de base des patients avec TBM et ceux classés comme non TB sont montrées dans Tables et

Figure Vue largeDownload slide Diagramme d’écoulement de l’étude CSF-MC, cellules mononucléées du liquide céphalo-rachidien; PBMC, cellules mononucléaires périphériques; Tuberculose, tuberculose; TBM, méningite tuberculeuse * Echantillons de liquide céphalo-rachidien pour les tests immuno-enzymatiques CSF-MC Les tests ELISPOT ont été obtenus chez des patients dont les échantillons sanguins n’ont pas été prélevés.Figure Vue d’ensembleDownload slide Diagramme de flux CSF-MC, cellules mononucléées du liquide céphalo-rachidien; PBMC, cellules mononucléaires périphériques; Tuberculose, tuberculose; TBM, méningite tuberculeuse * Des échantillons de LCR pour des dosages ELISPOT immuno-enzymatiques CSF-MC ont été obtenus chez des patients dont les échantillons de sang n’ont pas été prélevés

Table View largeTélécharger slideBaseline Caractéristiques cliniques des patients atteints de tuberculose présumée Tuberculose tuberculeuseTable View largeTélécharger slideBaseline Caractéristiques cliniques des patients atteints de tuberculose présumée TB Méningite

Diapositive de vue grandDétection de divers tests diagnostiques chez les patients atteints de tuberculose présumée TB MéningiteTable Voir grandTélécharger la diapositive Comparaison de divers tests diagnostiques chez des patients présumés atteints de tuberculose TB MeningiteDiagnostic des tests PBMC et CSF-MC ELISPOT Le test ELISPOT PBMC a été réalisé avec succès sur% des patients inscrits sujets Figure Les échantillons provenant de% des patients ont donné des résultats ELISPOT indéterminés Parmi les patients suspectés de TBM, le test ELISPOT CSF-MC a été réalisé sur% sujets qui ont accepté un prélèvement CSF supplémentaire Figure Comme montré dans le tableau, les patients qui ont accepté de participer les dosages ELISPOT du CSF-MC étaient plus âgés et présentaient des taux plus élevés de globules blancs, des niveaux de protéines plus élevés, des niveaux de glucose plus bas et des taux d’adénosine désaminase plus élevés dans leur liquide céphalorachidien par rapport à ceux n’ayant pas accepté le test ELISPOT CSF-MC. de% des patients participants ont rapporté indéterminé ELISPOT resu Les facteurs associés aux résultats indéterminés obtenus chez certains des patients ayant donné leur consentement au test CSF-MC ELISPOT sont indiqués dans le tableau. Le volume de LCR obtenu et le nombre de globules blancs dans le LCR ne semblent pas influencer la probabilité d’obtenir un résultat indéterminé pour le test ELISPOT CSF-MC Les réponses à ESAT- et CFP- dans les tests ELISPOT PBMC et CSF-MC sont détaillées dans la figure A Nous avons effectué des tests ELISPOT à la fois PBMC et CSF-MC simultanément chez% des patients suspects TBM Figure Parmi ces patients, les données de% sujets ont donné des résultats indéterminés à partir du test CSF-MC ou ELISPOT PBMC Figure Les ratios des résultats du test ELISPOT CSF-MC à PBMC sont présentés dans la figure B

Vue de la table largeDownload des comparaisons des caractéristiques cliniques et des profils du liquide céphalorachidien CSF entre les patients qui ont et n’ont pas accepté de participer à la cellule mononucléaire CSF CSF-MC Immunosorbent enzymatique ELISPOT AssayTable View largeTélécharger les comparaisons des caractéristiques cliniques et des profils du liquide céphalorachidien CSF entre les patients Qui a et n’a pas accepté de participer au test ELISPOT immuno-enzymatique à cellules mononucléées CSF-MC?

Vue de la table largeDisque de téléchargementFacteurs associés à des résultats indéterminés chez des patients ayant subi un test de tache immuno-enzymatique lié à des enzymes mononuclééesTest View largeDownload associé à des résultats indéterminés chez des patients ayant subi un test de tache immuno-enzymatique lié aux cellules mononucléées

Figure Vue largeDownload slideBox-and-whisker plot montrant les réponses à ESAT- et CFP-, en fonction de la cellule mononucléaire périphérique PBMC et du liquide céphalo-rachidien mononucléaires CSF-MC immuno-enzymatique spot ELISPOT dosages A, le ratio de CSF-MC à PBMC Les boîtes indiquent les quartiles inférieur et supérieur, les lignes centrales indiquent la médiane, et les extrémités des moustaches indiquent les intervalles de confiance en%. View large viewTélécharger slideBox-et -complet de Whisker montrant les réponses à ESAT- et CFP-, selon la cellule mononucléaire périphérique PBMC et le liquide céphalo-rachidien mononucléaire cellule CSF-MC immuno-enzymatique spot spot ELISPOT dosages A, le rapport de CSF-MC à PBMC ELISPOT dosage B, et Taux d’adénosine désaminase C chez les patients suspects de méningite tuberculeuse TBM Les cases indiquent les quartiles inférieur et supérieur, les lignes centrales indiquent le dian, et les extrémités des moustaches indiquent les intervalles de confiance en% Sur la base de la courbe ROC obtenue pour le test ELISPOT PBMC Figure A, nous avons déterminé que la coupure optimale était ⩾ taches Cependant, nous avons choisi ici une coupure pour le Test ELISPOT PBMC de ⩾ spots, sur la base de la pertinence clinique et de la recommandation du fabricant Lorsque nous avons utilisé ce seuil, la sensibilité et la spécificité de l’ELISPOT PBMC étaient%% intervalle de confiance [IC],% -% et%% CI, % -%, respectivement Sur la base de notre courbe ROC pour le test ELISPOT CSF-MC Figure A, nous avons sélectionné un seuil optimal de points When Lorsque nous avons utilisé ce seuil, la sensibilité et la spécificité de l’ELISPOT CSF-MC Les performances diagnostiques des tests ELISPOT dans les sous-groupes de patients testés avec le test ELISPOT CSF-MC n = ou avec le test ELISPOT PMBC seulement. n = sont montrés dans le tableau Les performances diagnostiques des dosages ELISPOT, par le diagnostic TBM catégorie de tic, sont présentés dans le tableau

Figure Vue largeDownload slideReceiver caractéristiques de fonctionnement Courbes ROC pour les différents tests utilisés pour détecter la méningite tuberculeuse chez tous les patients n = A et dans le sous-groupe qui a subi le liquide céphalorachidien mononucléaire CSF-MC immuno-enzymatique tache ELISPOT n = B ADA, adénosine désaminase niveaux dans le CSF; ADA / PBMC, test ADA positif & gt; Dosage ELISPOT IU / L ou PBMC positif spots; CSF-MC, dosage ELISPOT de CSF-MCs; Rapport glucose C / S, rapport CSF / glucose sérique; PBMC, dosage ELISPOT des cellules mononucléaires du sang périphérique; TST, test cutané à la tuberculineFigure Voir grandTélécharger la lameReceiver operating characteristicsCaractéristiques ROC pour les différents tests utilisés pour détecter la méningite tuberculeuse chez tous les patients n = A et dans le sous-groupe ayant subi un test du liquide céphalo-rachidien CSF-MC immuno-enzymatique ADA, niveaux d’adénosine désaminase dans le LCR; ADA / PBMC, test ADA positif & gt; Dosage ELISPOT IU / L ou PBMC positif spots; CSF-MC, dosage ELISPOT de CSF-MCs; Rapport glucose C / S, rapport CSF / glucose sérique; PBMC, dosage ELISPOT des cellules mononucléaires du sang périphérique; TST, test cutané à la tuberculine

Table View largeTélécharger DiapositiveDiagnostic Précision du diagnostic de la tuberculose Méningite tuberculeuse chez les patients atteints de tuberculose présumée MéningiteTable View largeTélécharger DiapositiveDiagnostic Exactitude du diagnostic de la tuberculose Tuberculose chez les patients atteints de tuberculose présumée

Vue de la table grandDownloader la précision diagnostique du diagnostic de la méningite tuberculeuse chez les patients atteints de méningite tuberculeuse présumée View largeTélécharger la diapositiveDisagnostic du diagnostic de la méningite tuberculeuse chez les patients atteints de méningite tuberculeuse soupçonnéeComparaison de divers tests diagnostiques du TBM Les résultats des divers tests diagnostiques utilisés pour évaluer les échantillons Les patients avec suspicion de TBM sont montrés dans le tableau La coloration bacillaire rapide, M tuberculosis PCR, et les cultures pour M tuberculosis étaient positives en%,% et% de tous les sujets, respectivement Les niveaux d’ADA du CSF sont détaillés dans la Figure C a révélé que les valeurs limites optimales pour les niveaux d’ADA dans le LCR et de LCR / glucose dans le sérum étaient IU / mL et, respectivement Figure A Les performances diagnostiques pour ces valeurs limites sont présentées dans le tableau La sensibilité et la spécificité des niveaux d’ADA dans le LCR & gt; U / L étaient%% CI,% -% et%% CI,% -%, respectivement. Les figures A et B montrent les précisions discriminatives relatives des différents tests, évaluées par l’aire sous les courbes ROC pour tous les patients n = et le sous-groupe ayant participé au test ELISPOT CSF-MC n = Si nous supposons que sensibilité et spécificité sont également importantes, le test ELISPOT CSF-MC semble être le test préféré pour le diagnostic de TBM. Cependant, la sensibilité la plus élevée a été obtenue ADA combiné & gt; Résultats d’ELISPOT U / L ou PBMC positifs%; % CI,% -%; ce test combiné a conféré un rapport de vraisemblance négatif de% CI, – lorsque les résultats des deux tests étaient négatifs

Discussion

Ici, nous avons évalué l’utilité clinique du test ELISPOT à base de cellules T récemment développé chez les patients suspectés de TBM. Nous avons constaté que le test ELISPOT PBMC chez les patients suspectés de TBM avait un% de sensibilité pour le diagnostic de TB active. Le test ELISPOT pour le diagnostic de TB extrapulmonaire était donc de% Ainsi, la sensibilité du test ELISPOT PBMC au TBM semble être légèrement inférieure à celle des autres types de TB extrapulmonaire. On ne sait pas encore si Récemment, Goletti et al ont démontré que les patients atteints de TB pulmonaire sévère présentaient une réponse plus faible aux peptides RD sélectionnés, par rapport aux patients atteints d’une maladie moins sévère. D’autres études ont corrélé l’ampleur de la réponse aux peptides RD avec la charge antigénique bactérienne du patient D’où la sensibilité relativement faible du test ELISPOT PBMC chez les patients Cependant, d’autres études seront nécessaires pour déterminer si la performance du test ELISPOT diffère chez les patients présentant diverses manifestations cliniques de TB extrapulmonaire car des lymphocytes T spécifiques à la tuberculose sont recrutés pour l’infection. sites en cas de TB active [-,], il semble logique que le dénombrement des cellules T effectrices par le test ELISPOT au site d’infection puisse augmenter la spécificité du diagnostic de TB active, comparé à celui obtenu en dosant le sang seul cette hypothèse, nos résultats ont montré que l’ELISPOT CSF-MC pour TBM avait une spécificité de% IC%,% -% Cependant, nous avons supposé que les méninges enflammées peuvent inévitablement permettre la migration lymphocytaire M circulante spécifique de la tuberculose chez les patients atteints de tuberculose inactive et latente. Infection tuberculeuse Ainsi, la comparaison des résultats des dosages ELISPOT sur des échantillons prélevés sur le site d’infection à ceux d’ELI Les tests SPOT effectués sur le sang peuvent fournir des informations supplémentaires pour distinguer TB active et TB inactive. Nous avons trouvé qu’un rapport ⩾ de l’ELISPOT CSF-MC aux résultats ELISPOT PBMC pourrait être utilisé pour distinguer les patients atteints de TB active de patients non TB, et Ces résultats sont en accord avec ceux de notre étude précédente Par conséquent, les présents résultats confirment notre hypothèse selon laquelle l’utilisation de tests ELISPOT spécifiques à M tuberculosis pour tester des échantillons de la Le tableau d’infection peut fournir un diagnostic plus spécifique de la tuberculose active comparé aux échantillons de sang seuls. Tableau et Figure B Notamment, moins de la moitié des patients ayant reçu un diagnostic de TBM présentaient des concentrations accrues de lymphocytes M spécifiques de la tuberculose sites ELISPOT CSF-MC ELISPOT / PBMC ELISPOT ratio ⩾, alors qu’aucun patient TBM-free n’avait plus de lymphocytes M spécifiques à la tuberculose dans le LCR que chez le bloo d Ceci est en contraste avec les résultats précédents que des concentrations accrues de lymphocytes M spécifiques à la tuberculose sont compartimentés sur les sites infectés, y compris le liquide pleural , le liquide de lavage bronchoalvéolaire , le liquide péritonéal et le LCR . savoir exactement pourquoi nos résultats diffèrent des observations précédentes Cependant, un phénomène similaire a été décrit chez les patients atteints de TBM Ceci pourrait indiquer que la barrière hémato-encéphalique enflammée permet une migration lymphocytaire spécifique de M tuberculosis moins efficace que les surfaces séreuses enflammées. Une autre explication possible pourrait être que les numérations cellulaires dans le liquide céphalorachidien puissent diminuer avec le temps après l’échantillonnage et être faussement faibles dans l’ELISPOT du liquide céphalo-rachidien. dosages , bien que nous ayons séparé le CSF-MC de la CSF en min après l’obtention des échantillons. Donc, le nombre de viab Les cellules du CSF peuvent modifier la sensibilité du test ELISPOT CSF-MC. Compte tenu du coût élevé des diagnostics faussement négatifs de TBM qui sont mortels si non traités, nous avons cherché à améliorer cette sensibilité en testant l’utilisation combinée de différents tests. En combinant ces tests, nous avons trouvé que le test ELISPOT ADA / PBMC fournissait la sensibilité la plus élevée mais avait une faible spécificité. Ainsi, l’utilisation de cette stratégie pour le diagnostic TBM pourrait conduire à des faux positifs, exposant potentiellement les patients sans TBM à une antibiothérapie inutile. traitements Cependant, l’utilisation d’un rapport ⩾ d’ELISPOT CSF-MC / PBMC comme seuil a fourni la plus grande spécificité. Par conséquent, l’utilisation graduelle de ces deux analyses combinées peut fournir aux cliniciens des informations plus précieuses. un rôle diagnostique des tests ELISPOT chez les patients présumés TBM Figure Cependant, d’autres études prospectives seront nécessaires pour valider l’utilisation pratique de cette stratégie de diagnostic

Figure vue grandDownload slideProposed rôle de diagnostic des tests immuno-enzymatiques ponctuelles chez les patients suspectés de méningite tuberculeuse [, résultat du test positif; ± résultat du test indéterminé; -, résultat de test négatif; ADA, niveau de l’adénosine désaminase du liquide céphalo-rachidien; CSF-MC, liquide céphalorachidien-cellules mononucléaires; PBMC, cellules mononucléées du sang périphérique; TBM, patients atteints de méningite tuberculeuse qui ont subi à la fois PBMC et CSF-MC test ELISPOT ont été inclus dans cette analyse bCSF-MC / PBMC ratio ⩾ n = Cette figure apparaît uniquement dans la version en ligne de la revueFigure View largeTélécharger diapositiveRôle de diagnostic de l’enzyme-linked immunosorbent essais ponctuels chez des patients présumés atteints de méningite tuberculeuse [, résultat positif au test; ± résultat du test indéterminé; -, résultat de test négatif; ADA, niveau de l’adénosine désaminase du liquide céphalo-rachidien; CSF-MC, liquide céphalorachidien-cellules mononucléaires; PBMC, cellules mononucléées du sang périphérique; TBM, patients atteints de méningite tuberculeuse qui ont subi à la fois PBMC et CSF-MC test ELISPOT ont été inclus dans cette analyse bCSF-MC / PBMC ratio ⩾ n = Ce chiffre apparaît uniquement dans la version en ligne du journalNotre étude a quelques limitations D’abord, certains peuvent argumenter que% des patients ont été classés comme ayant un TBM hautement probable ou probable, principalement sur la base des images cérébrales ou des résultats du LCR et de leurs réponses cliniques au traitement antituberculeux, en l’absence de confirmation microbiologique. Cependant, la confirmation bactériologique n’est pas suffisamment sensible être utilisé seul pour l’évaluation de nouveaux tests diagnostiques, qui peuvent être plus sensibles que la culture mycobactérienne Par conséquent, comme d’autres investigateurs l’ont fait dans d’autres études [,,,,,,], nous avons utilisé les catégories cliniques comme référence Normes pour le diagnostic, en incorporant des informations de la culture mycobactérienne, de la coloration de bacille acido-alcoolo-résistante, et des tests PCR M tuberculosis, ainsi que des tests cliniques, radiologiques et thérapeutiques. Critères d’évaluation Nous avons appliqué des définitions de cas strictement prédéfinis aux patients qui présentaient un TBM négatif à la culture ou non TB, et les chercheurs indépendants ont été invités à classer les patients sans connaître les résultats du test ELISPOT. les résultats des tests ELISPOT, de sorte que les résultats des tests n’affecteraient pas leurs décisions concernant le traitement antituberculeux empirique. En outre, lorsque des analyses de sous-groupes ont été effectuées sur des patients avec TBM confirmé ou avec TBM confirmé et hautement probable, les sensibilités et spécificités des différents les tests de diagnostic étaient similaires. Deuxièmement, il pourrait y avoir un biais de sélection parce que les tests ELISPOT CSF-MC ont été effectués chez% des patients, et les patients avec une maladie sévère ou plus de TBM ont été inclus dans ce sous-groupe. et généré des courbes ROC de divers tests sur le sous-ensemble de patients qui ont participé à t Le test ELISPOT du CSF-MC Tableau et Figure B Nos résultats suggèrent que le biais de sélection n’affectait pas substantiellement les résultats de notre étude Enfin, nous avons obtenu une proportion relativement élevée de résultats indéterminés dans notre test ELISPOT CSF-MC Six% des patients L’échantillonnage du liquide céphalo-rachidien a donné des résultats indéterminés dans le test ELISPOT CSF-MC Des études antérieures sur l’utilisation d’échantillons de sang périphérique pour un dosage de l’interféron-γ ont également montré que ~% d’échantillons donnaient des résultats indéterminés dans la pratique clinique courante. sur cette question devrait examiner les paramètres techniques, tels que le volume CSF optimal, la plage de temps optimale après l’échantillonnage CSF, et les valeurs limites optimales, pour le test ELISPOT CSF-MC En conclusion, nos résultats actuels indiquent que les dosages ELISPOT de PBMC et CSF- MC peut être un complément utile aux tests actuels pour le diagnostic de la TBM, en particulier lorsqu’il est utilisé en combinaison avec le niveau d’ADA dans le LCR

Remerciements

Nous remercions Sung-Cheol Youn Division de biostatistique, Centre de recherche médicale et d’information, Université de Ulsan College of Medicine, Séoul, Corée du Sud pour des conseils statistiques et Bibliothèque médicale Jaewoo Nam Asan, Université de Ulsan College of Medicine, Séoul, Corée du Sud pour l’excellente œuvre d’artSupport financier Don de la Fondation coréenne de recherche – Bourse E et Asan de l’Institut des sciences de la vie – Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: no conflicts

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